揭开血氨假阳性的面纱
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作者:检验之声
昆明市第一人民医院甘美医院检验科--李倩
血氨在正常人体内含量极低,主要来源于肠道中未被吸收的氨基酸、未消化的蛋白质、由血液中渗入肠道中的尿素经大肠埃希菌作用脱氨基生成及蛋白质代谢过程中生成,其含量检测是临床常用的蛋白质代谢产物之一[1],主要用于肝性脑病的诊断及疗效评价、肝功能衰竭的评价、肝性昏迷的鉴别诊断以及Reye综合征、3H综合征的诊断[2]。检验科及时发出准确的血氨结果对临床诊断至关重要。
案例经过
夜班一直很忙碌,除了要门诊抽血,还要在窗口接收住院标本,急诊标本则用气动物流传输。特殊管子如血氨肝素锂抗凝的血不用离心,直接用全血做。由于标本太多,没有及时处理,19:22分接收的标本,审核标本的时间已是22:08分。该患者的诊断是消化道出血,血氨值当时做了是108umol/L(0-54umol/L),再次重做,结果仍然是高。众所周知,大量消化道出血后,血液蛋白的分解物在肠道被吸收,以致血中氮质升高。血氨是真的高吗,从接收到出结果,标本已放置了二个多小时。于是联系临床再次重抽血复查,结果则是44umol/L,正常值。
案例分析
时间对血氨的检测真的是重要影响因素吗?还会有其他影响因素吗?我们使用的试剂是日本爱科来试纸条,标本量是肝素锂抗凝的全血20ul。检测原理如下:试纸条由血样接受层、定距层、指示层和基础层组成。当全血样品加到测试区域的样品接受层时,该层中含有硼酸缓冲液,在碱性环境下,样品中的氨离子转化成氨气,氨气穿过定距层到指示层(溴钾酚绿),触发颜色变化。颜色衍变的程度与所产生的氨气浓度成正比。说明书中对样本的要求是:1、使用全血样本。2、采集样本前,对采血区域彻底清洁、消毒及干燥。3、采集样本后立即使用,如果不能马上使用,在血中添加抗凝血剂(肝素或EDTA),密封保存冰箱,使用该血样时,检测前恢复室温并混匀。4、加样量准确。样本量过少(10ul以下)则颜色衍化不充分会得到较低检测结果。样本量过多(30ul以上),血样会流至指示层,此时不能进行检测。5、确保反应时间180秒。6、使用没有氨污染的工具,包括采血管和存放的器皿。7、含有汗液或组织液的样本可能产生偏高的检测值,采血部位要特别注意。其他几点实验室基本都可以做到,为了证实第三点,把刚重抽的肝素锂抗凝血放入冰箱,三小时重复检测一遍,结果依然是高。
时间肯定是重要影响因素,采集血样后,血浆中的多肽、谷氨酰酶等即可在谷氨酸氨基转移酶及γ-谷氨酰氨基转移酶的作用下水解释放出氨,即使储存在0℃,放置15min以上即可使血氨浓度升高[1]。另一方面,样本放置过久,红细胞内的氨也会释放到血浆中,引起血氨浓度升高。这也是避免溶血的因素,建议临床在标本采集后写上采集时间,这样接收标本的时候就知道中间经历了多长时间。急诊科标本用气动物流方式传输,解决了标本放置时间和温度对检测结果的影响。有文献报道,在4℃及25℃时放置4小时,血氨值明显升高。
我们实验室采用的是微量扩散法,TAT也要求30min之内完成。但是人体内血氨浓度在血液中分布不同,动脉血中的含量为静脉血的0.5-2倍[3]。因此此方法应确保标本来源的一致性,以确保病情和疗效评估。此外,环境、温度、药物、吸烟等因素也是检测血氨的影响因素。
总结
检测血氨影响因素很多,为保证实验室测定血氨值的准确性,实验室接收标本后应立即检测,避免血氨假性升高。说明书的要求仅作为参考,应该与实际工作相结合,才能准确发出结果。
参考文献:
[1] 尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2015:304-306.
[2] 白巨明.标本放置时间及温度对血氨结果的影响[J].检验医学与临床,2015,12(19):2941-2942.
[3] 陈灏珠,林果为等.实用内科学[M].13版。北京:人民卫生出版社,2009:2123.
编辑:青翠欲滴
审校:晨晨
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